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林芝藥廠微生物實驗室設計與建設
發布時間:2020-02-29 01:11:27瀏覽次數:3564

藥品的質量控制不僅與其生產過程密切相關,同時也與實驗室質量設計和管理緊密相連,特別是無菌藥品生產企業將微生物實驗室無菌檢查的實驗結果作為產品放行的重要指標,因此藥品微生物質量控制顯得尤為重要。藥品微生物檢驗的對象是分布不均勻的活的生物,檢驗結果重現性差,為保證微生物檢驗結果的可靠性和檢驗操作人員的安全性,必須按照G (2010年修訂版)和中國藥典2010版《藥品微生物實驗室規范指導原則》要求對微生物實驗室進行設計和管理,有效防止檢驗過程中出現因污染和交叉污染而造成的“假陽性”和“假陰性”的結果。

1 相關法規要求
中國藥典2010年版《藥品微生物實驗室規范指導原則》中規定微生物實驗室應有符合無菌巡查法(附錄XⅢB)和微生物限度檢查法(附錄x IIIC)要求的、用于具有開展無菌檢查、微生物限度檢查、無菌采樣等檢測活動的、獨立設置的潔凈室(區)或隔離系統,且須配備實驗準備區、樣品接收和貯存區、培養室、污染物處理等區域并顯示標識。
GMP(2010年修訂版)第六十四條規定,實驗室的設計應當確保其適用于預定的用途,并能夠避免混淆和交叉污染。
2 微生物實驗室設計布局現狀及風險
陽性對照室用于菌種的處理,因其污染嚴重藥廠都已單設更衣室和緩沖間分室進行,而無菌檢查、微生物限度檢查與抗生素微生物檢定的實驗室未嚴格分開(公用更衣室及緩沖間)。在GMP檢查中的2802條項中明確規定:生物檢定、微生物限度檢定和放射性同位素檢定等應分室進行,條項解釋中提到“無菌室和微生物限度室不可公用更衣室及緩沖間,防止污染無菌室”。公用更衣室及緩沖間勢必會污染無菌室,微生物限度室的樣品是含菌的,污染無菌室后產品可能出現假陽性的結果,抗生素具有抑菌性,污染無菌室后產品可能出現假陰性的結果,這樣根本無法保證無菌檢查結果的真實性,也無法就出現的超標結果進行調查,無菌檢查也就失去了意義。
無菌檢查室、微生物限度室、抗生素微生物檢定、陽性對照實驗室因送回風系統設置不合理無法調整壓差,有的藥廠不同實驗室的回風共用一道“夾墻”,會造成實驗室之間的交叉污染。對于要求無菌的環境(如無菌檢查室、微生物限度檢查室)應該保持相對正壓,防止有菌區空氣進入發生污染。對于污染源(如陽性對照室、抗生素微生物檢定室)應該保持相對負壓,防止污染物質的擴散對實驗結果和人員安全造成影響。
微生物檢驗室通常離生產區較遠,且可能設置在樓層上,有的藥廠在微生物檢驗室的潔凈區內用飲用水作為清潔用水,用于人員的洗手和房間的清潔,飲用水中含有大量的細菌和不溶性微粒,會對無菌環境造成破壞。有的藥廠微生物檢驗室采用明管排水。
微生物檢驗室潔凈區的內表面不平整,如照明燈、壓差計未采用嵌入式安裝,不易進行清潔和El常擦拭消毒。
有菌區和無菌區的潔具混用,帶來交叉污染。無菌區的清潔用具沒有經過滅菌處理,消毒液沒有經過除菌過濾,無菌區的環境從而遭到破壞,影響實驗結果。
3 微生物實驗室設計要求
微生物實驗室的布局、設計和建造應有利于避免交叉污染、便于清潔及日常維護,以保證高潔凈度的無菌(fungus)實驗環境;其次,人和物是潔凈區的主要污染源。因此,必須對系統的操作人員進行培訓,讓其充分掌握系統的運行要求,使實驗用品、人帶來的污染得到有效控制(control)。在人、物流的設計和管理上,基本原則是不經過凈化處理的人、不經消毒滅菌的物品不能進入無菌區域。
3.1 人流
根據GM~(2010版修訂版)要求,人、物流分開。4個實驗室擁有獨立的更衣系統,避免交叉污染。物品集中通過潔凈互鎖傳遞窗傳遞,對于大容量注射劑檢品量大的問題,防止頻繁開啟傳遞窗造成無菌檢查室環境的破壞,物料經外清緩沖間傳入無菌檢查室。所有的樣品經75%酒精在樣品準備室擦拭后傳入相應實驗室,其他器具均需滅菌后傳入。
美國藥典規定,用于進行無菌檢驗的設施與用于制藥的設施應該是一致的,并規定,用于無菌檢驗的設施不應比無菌加工生產設施造成更多的微生物污染幾率。因此,合理的設計應該包括更衣區域和通過氣閘。環境的監測和著裝應該與藥品生產中相一致。根據風險(risk)管理(guǎn lǐ)的原則,對于要求相對無菌環境的無菌檢查室(B+A)和微生物限度檢查室(c+A)基本采用嵌套式設計。
無菌檢查室和微生物(Micro-Organism)限度室要求檢測環境無菌的,需把操作人員所用潔凈服進行包裹以防止污染,無菌檢查室和微生物限度室內操作人員不能超過2名。無菌服經清洗后裝入呼吸袋內在雙扉脈動真空滅菌柜進行滅菌,在進入無菌區時裝有無菌服的呼吸袋帶入。需制定SOP對更衣過程中的每一個細節進行規范,更衣的程序為:脫衣 洗手消毒-÷帶手套脫鞋_÷穿無菌鞋一穿無菌內服 脫手套_帶手套 穿無菌外服_÷帶無菌手套。
此外,陽性對照室的潔凈級別可設計為C+A,效價測定室的潔凈級別可設計為D級。
3.2 物流
進入的物流與人流應嚴格分開,每個實驗室都有單獨的傳遞窗傳遞樣品和實驗用具,所有樣品必須用75%的酒精在樣品擦拭區進行擦拭,用于無菌區的實驗用具必須經滅菌后才能傳入,滅菌的效果應當經過驗證,傳遞窗必須裝有紫外燈進行消毒,需定期對其消毒效果進行評價以便及時更換紫外燈管。潔凈實驗室每類生物安全防護實驗室根據所處理的微生物及其毒素的危害程度各分為四級。各級實驗室的生物安全防護要求依次為:一級最低,四級最高。對于陽性對照實驗室可能產生的嚴重污染物宜通過專用的傳遞窗傳遞,并做滅活處理。各實驗室的潔具單獨存放,防止交叉污染。3.3 空調系統整個系統可采用1臺潔凈空調,因無菌檢查室和微生物限度室內的空氣質量較高可經回風循環利用。為避免交叉污染,抗生素微生物檢定室、陽性對照室不回風,采用全排,并采用“豎井”式回風,單閥單控,保證壓差。
無菌檢查室和穿無菌外衣兩個房間須達到B級要求,因其操作人員僅限于1人,發塵量較少,可參考ISPE(國際制藥工程協會)將換氣次數設為40~60次/h,C級區的換氣次數設為20~40次/h,確定層高后便可以確定空調的額定風量,但必須考慮(consider)風量的損耗。空調系統必須全天24 h開啟, 以維持正壓防止污染。因故停機必須驗證。
3.4 水系統
實驗室通常離純化水制水間較遠,宜購買小型純化水機用于無菌(fungus)區人員洗手、衛生清潔、儀器清洗等,純化水即制即用,并經除菌過濾后使用。飲用水含有:大量的細菌會對實驗室的環境造成破壞。水的輸送管線要有一定的坡度,采用步步低的方式,管道殘留在設置的最低點進行排放。應設夾層放置排水管線。
3.5 潔凈裝修
整個實驗室的潔凈裝修施工必須符合GB 50591—2010《潔凈室施工及驗收規范》的要求,其平面布局如附圖所示。
4 微生物實驗室管理
按照中國藥典2010版《藥品微生物實驗室規范指導原則》要求,微生物實驗人員應具備微生物學的教育背景,應經培訓并授權方可上崗。潔凈實驗室實驗脊椎動物生物安全防護實驗室,其適用微生物范圍與同級的一般生物安全防護實驗室相同。在微生物實驗室的入口應設置門禁裝置,只允許微生物實驗人員進入。還應定期對其進行無菌操作控制后的無菌服表面進行監測(Food Monitor),防止人為差錯。
4.2 環境監測
應定期對微生物實驗室的環境進行監測, 以確保環境處于受控狀態,包括沉降菌、浮游菌、塵埃粒子、設備表面監測、高效過濾器檢漏,請參照相應的國家標準,設定適宜的監測頻率進行環境監測。潔凈實驗室每類生物安全防護實驗室根據所處理的微生物及其毒素的危害程度各分為四級。各級實驗室的生物安全防護要求依次為:一級最低,四級最高。
4.3 清潔消毒

微生物實驗室中無菌區域應盡量減少“陰陽角”,便于無菌室日常的擦拭消毒,無菌區所用的潔具應經滅菌處理,所用的水消毒劑應經除菌過濾。有菌區和無菌區的潔具不能共用,應在潔具顏色上加以區分。
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