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柳州科普:pcr實驗室是做什么的?
發布時間:2024-12-05 09:41:45瀏覽次數:9515

什么是PCR實驗室?

PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統,能迅速掌握患者體內的病毒含量,其精確度高達納米級別,精確檢測乙肝病毒在患者體內存在的數量、是否復制、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據。

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二、PCR實驗室布局

原則上分為四個區域:試劑準備區、樣品制備區、擴增區和擴增產物分析區。

PCR實驗室原則上為試劑準備區、樣品制備區、擴增區和擴增產物分析區四個單獨的工作區域并設有專用走廊,各工作區域應設緩沖間,工作區與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區應是分隔獨立的,各工作區有明顯的標志,不能直通,如果緊密相連,需安裝物品傳遞窗。

PCR實驗室區域的設置并不是一成不變的,以下幾種情況需要說明:

1.如果樣本在擴增之前需要粉碎處理,則需要增加一個區域用于樣品的粉碎。

2.如果采用實時熒光PCR法,則擴增區和分析區可以合并為一個區。

3.如果采用全自動化PCR分析儀,則標本制備區、擴增區和分析區可以合并為一個區。

 

前兩區為擴增前區,后兩區為擴增后區,擴增前區與擴增后區應嚴格分開。實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴增前區流向擴增后區,即從試劑準備區、樣品制備區到擴增區和擴增產物分析區,不得逆向流動。實驗室的氣流也應從擴增前區流向擴增后區,不得逆向流動。各工作區頂部應安裝紫外燈,紫外燈的波長為254nm,每20㎡一支40W的紫外燈。

三、PCR實驗室通風系統及壓力控制

四大區域應形成單向流線、宜采用全送全排。

各區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗之間的相互干擾,防止氣溶膠擴散對實驗過程造成污染。

PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區壓力要求。

另外,PCR實驗室內通常有生物安全柜、通風柜等生產設備,這類設備排風量大且使用時間有間隔性,并不與空調系統運行時間一致,這就導致有這些設備的房間在設備啟停的時候很容易失壓,原本正常的壓力梯度瞬間就破壞了。這正是PCR實驗室空調系統設計的難點所在。

四、PCR實驗室裝修裝飾

材料要求:

實驗室圍護結構應牢固、氣密性好。所有陰陽角宜采用圓弧過渡,墻體內壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒。地面使用PVC卷材或環氧樹脂自流坪,材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。

必備條件:

1、必須擁有標準的的PCR熒光實驗室。

2、檢測設備必須符合標準PCR熒光實驗室設置要求:熒光定量PCR儀+實時熒光定量試劑+通用電腦+自動分析軟件,構成PCR-DNA/RNA實時熒光定量檢測系統。

3、必須通過國家臨床檢驗中心的驗收和認證。

4、PCR實驗室必須建立嚴格的實驗室管理制度、建立標準化操作程序(SOP)、建立系列質量管理文件等,確保實驗室日常運行符合國家衛生部的要求,確保檢測結果準確、確保實驗室衛生安全,確保實驗室長期穩定運行。

5、必須在無菌無塵環境下進行操作。

五、PCR 實驗室的工作流程

首先,需要采集合適的樣本。樣本的類型根據檢測的目的而定,可以是血液、組織、細胞等。接著采集到的樣本需要進行處理,以提取出其中的 DNA 或 RNA。這個過程需要嚴格的操作規范,以確保樣本的質量和純度。然后,將提取出的 DNA 或 RNA 加入到 PCR 反應體系中,在特定的溫度和時間條件下進行擴增。PCR 擴增過程需要精確的溫度控制和時間管理,以確保擴增的準確性和效率。最后擴增后的產物需要進行檢測和分析。常用的檢測方法包括凝膠電泳、熒光定量 PCR 等。通過檢測和分析,可以確定樣本中是否存在特定的 DNA 或 RNA 片段,以及其含量和性質。

六、PCR 實驗室的重要性

1、快速準確的檢測

PCR 技術具有高度的敏感性和特異性,能夠在短時間內檢測出微量的病原體或基因突變。這對于疾病的早期診斷和治療至關重要。

2、為科學研究提供有力支持

PCR 實驗室為生命科學研究提供了強大的工具,幫助科學家們深入了解生命的奧秘,推動科學技術的發展。

3、保障公共衛生安全

在傳染病防控、食品安全等領域,PCR 實驗室能夠及時檢測出病原體,為公共衛生安全提供保障。

總之,PCR 實驗室是一個充滿科技感的地方。它通過先進的技術手段,為疾病診斷、科學研究和公共衛生安全提供了強有力的支持。隨著科技的不斷進步,PCR 實驗室的作用將會越來越重要,為人類的健康和發展做出更大的貢獻。

 


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